Вопрос – ответ для Специалистов

Какие лабораторные тесты используются для идентификации эмбриональных стволовых клеток?

На разных этапах в течение процесса генерирования линий эмбриональных стволовых клеток, ученые тестируют клетки, чтобы удостовериться, что они обладают плюрипотентностью, присущей эмбриональным стволовым клеткам. Этот процесс называется характеризацией.

До сих пор ученые, которые изучают эмбриональные стволовые клетки человека не согласовали стандартной процедуры тестирования для определения клеточных фундаментальных свойств. По этой причине основная цель ISCF- это установление стандартных универсальных критериев для выделения, характеристики и поддержки стволовых клеток посредством ряда характеристических проектов. Также, ученым известно, что многие из тестов, которые они используют на данный момент, не могут быть оптимальным индикатором ключевых биологических свойств клеток и функций.

Эти тесты включают в себя:

• Выращивание и субкультивирование стволовых клеток в течение многих месяцев. Это подтверждает, что клетки способны поддерживать себя в течение длительного периода времени. Ученые проводят тестирование культуры под микроскопом для того, чтобы видеть, что клетки выглядят здоровыми и остаются недифференцированными.
• Специальные методы для определения присутствия поверхностных маркеров, которые были найдены лишь на недифференцированных клетках. Другой важный тест- определение присутствие протеина Oct-4, продуцируемого недифференцированными клетками. Oct-4 является транскипционным фактором, ответственным за включение и выключение генов в нужное время, что является важной частью процесса клеточной дифференцировки и развития эмбриона.
• Цитогенетическая диагностика. Этот метод непригоден для определения генетических мутаций в клетках.
• Тестирование способности клеток к субкультивированию после замораживания-таяния либо после пересадки.
• Определение плюрипотентности человеческих эмбриональных клеток при помощи: 1) спонтанной дифференцировки клеток в клеточной культуре; 2) манипулирования с клетками таким образом, что они будут дифференцироваться с формированием специфических типов клеток; 3) введение клеток в иммуносупрессированных мышей для тестирования формирования доброкачественных опухолей, названных тератомами.

« Предыдущий вопрос

К списку вопросов